基因文库是指将一组生物体的完整基因组序列信息储存在数据库中的文件集合。它包含了多种生物的基因组信息，如人类、小鼠、大米等。基因文库与基因芯片等技术相结合，可以促进基因研究的进展，并为生命科学、医学研究以及基因工程、动植物育种等领域提供丰富的资源和数据。
基因文库可以分为基因组文库和部分基因文库（如cDNA文库）。基因组文库包含某种生物的所有基因，而cDNA文库只包含某种生物的部分基因，通常是通过将mRNA反转录成cDNA来构建。
基因文库的建立是通过将生物体的总DNA用限制性内切酶切割成片段，然后将这些片段随机地连接到载体DNA分子上，再转移到宿主细胞中，通过细胞增殖构成各个片段的无性繁殖系（克隆），当克隆数目足够多时，就形成了一个包含该生物全部或部分基因的基因文库