吸光度呈负值的原因可能有以下几种：
空白试验值过高 ：空白试验值是指在没有样品的情况下，仅加入溶剂和试剂所测得的吸光度。如果空白试验值过高，会导致实际样品测定的吸光度为负值。试剂批号或溶液配置问题：
使用不同批号的试剂或不同时间配置的溶液进行标准曲线和实际样品测定时，由于标准曲线的试剂基底偏高，可能会导致样品测定吸光度为负值。
纯水质量问题：
进行标准曲线测量时使用的纯水不合格，可能会影响吸光度的测量结果，导致出现负值。
仪器问题
零点未校准准确：
分光光度计在使用前需要进行零点校准，即将参比溶液放入样品室，调整仪器使吸光度显示为零。如果零点校准不准确，可能会导致后续测量出现负吸光度。
仪器故障：仪器的光路系统、检测器或其他部件出现故障，也可能导致吸光度测量结果异常。
操作问题
操作顺序错误：在进行实验时，如果加样顺序错误，例如样本和试剂的加入顺序颠倒，可能会导致吸光度测量结果异常。
器皿不干净：反应杯、搅拌棒等器皿不干净，可能会导致交叉污染或反应液被稀释，从而造成吸光度突然下降，出现负值。
清洗针堵塞或漏气：清洗针堵塞或漏气会导致反应液无法正常抽走或添加清洗液，反应液被稀释，造成吸光度突然下降，可能出现负值。
样品问题
严重脂血或黄疸标本：某些特殊样本如严重脂血或黄疸标本，在加入试剂后反应的吸光度可能低于空白值，导致吸光度差值为负。
样品基体和空白不一致：当样品基体和空白的吸光度不一致且样品基体的吸光度低于空白时，也会出现吸光度为负数的情况。
信号接反或气泡：
流动相的紫外吸收一般较小，如果信号接反或有气泡产生，也可能导致吸光度测量结果出现负值。
综上所述，吸光度呈负值的原因多种多样，可能涉及仪器、试剂、操作等多个方面。在实际操作中，应严格按照实验步骤进行，确保仪器校准准确，器皿干净，以避免出现负值。如果出现负值，应仔细检查实验过程，找出可能的原因并进行相应的调整。