多肽的溶解方法主要取决于其化学性质,包括其电荷状态和疏水性。以下是一些常用的多肽溶解方法:
根据电荷选择溶剂
碱性多肽(净电荷数 > 0):通常用水溶解,若溶解性不佳,可加入少量醋酸(10%以上)或TFA(三氟乙酸,25ul)溶解后再用水稀释。
酸性多肽(净电荷数 < 0):通常用水溶解,若溶解性不佳,可加入氨水(25ul)溶解后再用水稀释。
中性多肽(净电荷数 = 0):一般需要用有机溶剂如乙腈、甲醇或异丙醇,DMSO等溶解。
使用共溶剂
对于疏水性较强的多肽,可以先用少量有机溶剂(如DMF、ACN、异丙醇、乙醇等)溶解,然后缓慢加入水溶液中稀释。
调节pH值
多肽在不同pH值下的溶解性差异较大。例如,酸性多肽通常在低pH值下溶解较好,而碱性多肽则在高pH值下溶解效果更佳。可以通过调节溶液的pH值来优化多肽的溶解度。
超声处理
利用超声波处理技术可以在一定程度上增加多肽的溶解度。超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度,但需注意避免多肽降解。
添加助溶剂
可以加一些促溶剂和去污剂如Triton X-100,低浓度的变性剂如1M盐酸胍和2M尿素等,降低溶液的极性,增加溶解性。
冷冻干燥
对于含Cys、Met或TrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少。在将多肽暴露于空气之前,冷冻干燥多肽可以放于室温,这有助于减少湿度影响。
建议
先进行小量试验:在选择溶剂和溶解方法时,建议先取少量多肽进行试验,以确定最佳溶解条件。
避免使用有害溶剂:在选择溶剂时,要确保所选溶剂与实验条件兼容,且不会对多肽造成降解。
注意保存条件:多肽应保存在干燥、无菌的环境中,避免氧化和降解。
通过以上方法,可以有效提高多肽的溶解性,从而优化实验结果。