双向电泳（two-dimensional electrophoresis, 2-DE）是一种 等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合技术。该技术首先通过等电聚焦电泳按照蛋白质的等电点（pH）进行分离，随后在垂直方向上通过SDS-PAGE根据分子大小进行分离。这样，通过两次电泳，可以得到一个二维分布的蛋白质图谱。
具体操作步骤如下：
等电聚焦电泳：
在胶中加入双性电解质溶液，加上电场后建立稳定的pH梯度。蛋白质溶液加入后，在电场作用下，不同等电点的蛋白质会分离开来，并聚集在胶条上不同的pH梯度区。
SDS-PAGE电泳：
将等电聚焦后的胶条在SDS和DTT中平衡后，贴在SDS-PAGE胶板的负极端进行电泳。在同一等电点内的蛋白质，由于分子量不同，会在垂直方向上分开。
双向电泳具有以下优点：
高分辨率：能够同时分离大量蛋白质，分辨率高，信息量大。
高灵敏度：可以检测到低丰度的蛋白质。
广泛适用性：适用于比较蛋白质组学研究，能够分析成百上千的基因表达产物。
尽管双向电泳技术非常强大，但也存在一些局限性，如操作复杂、重复性差等，这些局限性在一定程度上限制了其在实际应用中的普及。
建议在实际应用中，根据具体研究需求和条件选择合适的双向电泳系统，如ISO-DALT、IPG-DALT或NEPHGE等，并进行充分的实验优化，以确保实验结果的准确性和可靠性。